为寻找药物新靶点选择合适的细胞系

基于siRNA技术的靶基因沉默

通过特定的siRNA寡核苷酸或者siRNA复合物介导靶基因的沉默

  • 通过Taqman技术或者Western-blot技术分别验证mRNA或者蛋白水平的基因沉默效率。
  • 过CTG细胞活力实验和软琼脂克隆形成实验分别检测靶基因沉默对肿瘤细胞2D和3D生长水平的抑制作用

Western Blot方法验证靶基因沉默效果
CellTiter Glo方法检测靶基因沉默后细胞增殖
软琼脂克隆形成方法检测靶基因沉默后细胞增殖
基于shRNA技术的靶基因沉默
  • pTRIPZ系统 (Open Biosystems):Tet 诱导靶基因沉默技术
  • pSLIK系统 (ATCC):Tet 诱导靶基因沉默技术
  • pGIPZ系统 (Open Biosystems):长时程靶基因沉默技术
  • pLKO系统 (Open Biosystems):长时程靶基因沉默技术

Taqman方法验证稳转细胞株靶基因沉默效果

Western Blot方法验证稳转细胞株靶基因沉默效果

Western Blot方法验证稳转细胞株靶基因沉默效果

Detection of Target A Knockdown and Down-regulation of Methyl Marker in Dox-induced Stable Cell Lines


利用慢病毒感染技术构建稳转细胞株
  • pTRIPZ系统 (Open Biosystems):Tet 诱导靶基因沉默技术
  • pSLIK系统 (ATCC):Tet 诱导靶基因沉默技术
  • pGIPZ系统 (Open Biosystems):长时程靶基因沉默技术
  • pLKO系统 (Open Biosystems):长时程靶基因沉默技术

Taqman方法验证稳转细胞株靶基因沉默效果

Western Blot方法验证稳转细胞株靶基因沉默效果

Western Blot方法验证稳转细胞株靶基因沉默效果

Detection of Target A Knockdown and Down-regulation of Methyl Marker in Dox-induced Stable Cell Lines