DOT1L（端粒沉默干扰因子1样蛋白）通过其对H3K79的甲基转移酶活性，在转录调控、细胞周期调控和DNA损伤应答中发挥重要作用。此外，DOT1L被认为参与由MLL（混合谱系白血病）融合蛋白驱动的MLL重排白血病的发生发展，因而成为白血病治疗的关键靶点。因此，发现新型DOT1L抑制剂的需求十分迫切。本研究从建立基于AlphaLISA的DOT1L高通量筛选（HTS）实验入手开展抑制剂发现工作。结合放射性抑制实验和表面等离子体共振（SPR）结合实验，我们发现了化合物3及其活性类似物作为新型DOT1L抑制剂，体外IC50值为7 μM至20 μM。结合对这些化合物构效关系（SAR）与结合模式的分析，我们为后续开发更强效的DOT1L抑制剂提供了线索。此外，化合物3和9可有效抑制MLL重排白血病细胞MV4-11的增殖，并可诱导细胞周期阻滞与凋亡。综上，我们建立了基于AlphaLISA方法的HTS平台，用于筛选和发现新型DOT1L抑制剂，并借此发现化合物3及其类似物为强效DOT1L抑制剂，在MLL重排白血病治疗中具有良好的应用前景。
